Методы диагностики и профилактики микробной контаминации при трансплантации эмбрионов
Рефераты >> Ботаника и сельское хоз-во >> Методы диагностики и профилактики микробной контаминации при трансплантации эмбрионов

Результаты бактериологических исследований после инокуляции культур и добавления антибиотиков через 1,5-2 часа показали, что к комбинациям пенициллин + гентамицин в концентрациях 100 Ед/мл и 12 мкг/мл и ампициллин + гентамицин в тех же концентрациях чувствительными оказались все взятые в опыт штаммы микроорганизмов. Концентрация гентамицина 4, б, 10 мкг/мл в комплексе с пенициллином (100 Ед/мл) значительно снижали рост микрофлоры, но полной бактерицидной активности не наблюдалось.

Комбинация пенициллина со стрептомицином, в указанных концентрациях, оказалась неэффективной против синегнойной палочки и испытуемого штамма кишечной палочки.

Для санации промывных буферных сред использовали комплекс антибиотиков гентамицин + ампициллин в концентрации 12 мкг/мл и 100 Ед/мл, предложенный А.Д. Бугровым и И.М. Величко (1986). Нашими исследованиями подтверждено, что лучшим антимикробным средством является вышеуказанная комбинация антибиотиков.

Таблица 1. Сравнительная активность комбинаций антибиотиков на чистые культуры микроорганизмов

Концентрация антибиотиков (мкг/мл и ЕД/мл)

Культуры микроорганизмов

Количество проб

Рост микроорганизмов на питательных средах

МПА в чашках (кол-во колоний)

МПБ

Среда Булира

Гентамицин 4 Пенициллин 100

В. Subtilis

Ps. aeruginosa

St. aureus

E. coli

4

4

4

4

132–327

132–327

-

-

+

-

-  

-  

Гентамицин 4 Ампициллин 100

B. subtilis

Ps. aeruginosa

St. aureus

E. coli

4

4

4

4

9–72

-

-

+

-

-  

-  

Гентамицин 6 Ампициллин 100

B. subtilis

Ps. Aeruginosa

St. aureus

E. coli

5

5

5

5

ед.

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

Гентамицин 10

Ампициллин 100

B. subtilis

Ps. aeruginosa

St. aureus

E. coli

2

2

2

2

-

ед.

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Гентамицин 12

Пенициллин 100

B. subtilis

Ps. aeruginosa

St. aureus

E. coli

4

6

4

5

_

-

-

-

_

-

-

-

-

Гентамицин 12

Ампициллин 100

B. subtilis

Ps. aeruginosa

St. aureus

E. coli

4

4

4

4

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Пенициллин 100 Стрептомицин 30

B. subtilis

Ps. Aeruginosa

St. aureus

E. coli

5

5

5

5

сп л. рост

сп л. рост  

+

+

+

+

+  

Примечание: (+) наличие роста, (–) отсутствие роста. В контроле без антибиотиков во всех пробах наблюдали рост вышеуказанных культур микроорганизмов.

В последствии нами проведен опыт. Результаты приведены в таблице 2.

Из данных таблицы 2 видно, что из 14 смывов, санированных комплексом антибиотиков гентамицин-ампициллин в концентрациях 12 мкг/мл и 100 Ед/мл, соответственно, 12 – свободных от микроорганизмов, что составляет 85%. В контрольных смывах без добавления антибиотиков только 42,9% смывов стерильны. Различия в росте микроорганизмов на питательных средах из контрольных и опытных смывов достоверны (Р<0,001). Учитывая вышеизложенное, мы считаем целесообразным для санации промывных буферных сред использовать комплекс антибиотиков гентамицин-ампициллин в концентрации 12 мкг/мл и 100 Ед/мл.

Таблица 2. Действие комплекса антибиотиков гентамицин-ампициллин (12 мкг/мл и 100 Ед/мл) на микрофлору промывных сред

Среды для вымывания эмбрионов

Всего исследовано смывов

Отсутствие роста микроорганизмов на питательных средах (МПБ, МПА)

Количество

%

Гентамицин + ампициллин (12 мкг/мл и 100 Ед/мл) (опыт)

14

12

85

Без антибиотиков (контроль)

14

6

42,9

Следовательно, из санированных промывных сред матки доноров большая вероятность получить деконтаминированные эмбрионы и предотвратить занос микроорганизмов в матку реципиента.

Полученые нами, промывные маточные среды от коров-доноров оценивали по внешним признакам: цвету, прозрачности. Из 14 проб, в которые антибиотики не добавляли, в 8 случаях (57,1%) отмечали рост микрофлоры на питательных средах и по внешнему виду они были мутными с примесями слизи. Это было основанием предположить, что в промывную маточную среду слизь могла попасть из влагалища или шейки матки, а также из матки при наличии скрытого эндометрита. Добавление антибиотиков в промывные буферные Среды снижали их бактериальную загрязненность и профилактировали эндометриты.

Кроме этого, санированная промывная среда профилактирует возникновение эндометритов при многократном использовании доноров. Микроорганизмы, попадая в микротравмы при извлечении эмбрионов, могут вызвать эндометриты. Об этом свидетельствуют данные В.И. Завирюхи, С.П. Хомина и соавт. (1987). Проведенный ими анализ практической работы показывает, что после проведения нескольких вымываний у коров-доноров развивается гнойной эндометрит.


Страница: