Программа учебной дисциплины Биохимия
Тематические планы для очной формы обучения
|
№ п/п |
Тема |
Кол-во часов | ||
|
Лекц. |
Лаб. |
Сам. | ||
|
Общее число часов |
68 |
68 | ||
|
1. |
Приготовление реактивов для практических работ. |
4 |
4 | |
|
2. |
Титрометрическое определение активности каталазы. |
4 |
4 | |
|
3. |
Фотометрическое определение активности трипсина. |
4 |
4 | |
|
4. |
Флюориметрическое определение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы (ФМСФ-КП). |
4 |
4 | |
|
5. |
Определение кинетических параметров реакции гидролиза трипсином бензоил-аргинин-пара-нитроанилида. |
4 |
4 | |
|
6. |
Определение типа ингибирования трипсина высокомолекулярным ингибитором трипсина из бычьего легкого. |
4 |
4 | |
|
7. |
Влияние температуры и рН среды на активность трипсина |
4 |
4 | |
|
8. |
Кинетика ферментативных реакций. |
4 |
4 | |
|
9. |
Частичная очистка ФМСФ-КП из мозга крыс фракционированием сульфатом аммония. |
4 |
4 | |
|
10. |
Частичная очистка ФМСФ-КП из мозга крыс методом гель-фильтрации. |
4 |
4 | |
|
11. |
Частичная очистка ФМСФ-КП из мозга крыс методом ионообменной хроматографии (на КМ-целлюлозе). |
4 |
4 | |
|
12. |
Методы исследований в области энзимологии. |
4 |
4 | |
|
13. |
Определение ДНКазы – фермента-маркера ядра. |
4 |
4 | |
|
14. |
Определение сукцинатдегидрогеназы – маркера митохондрий. |
4 |
4 | |
|
15. |
Определение кислых протеаз – ферментов-маркеров лизосом. |
4 |
4 | |
|
16. |
Определение глюкозо‑6‑фосфатазы – фермента-маркера микросомальной фракции. |
4 |
4 | |
|
17. |
Выделение и очистка ферментов. Цитология ферментов. |
4 |
4 | |
Содержание дисциплины
1. Введение
Энзимология – наука о ферментах. Отрасли энзимологии: препаративная энзимология, инженерная энзимология. Методы энзимологии.
Способы количественного выражения ферментативной активности.Общая активность, удельная активность, молекулярная активность, активность каталитического центра.
2. Методы определения активности ферментов
Современные методы: химические, электрохимические, фотометрические, спектрофотометрические, флюориметрические.
3. Сравнительная биохимия ферментов
Органная специфичность распределения ферментов. Изучение органного распределения ферментов. Специфичность распределения ферментов в тканях: нервной ткани, мышцах, печени, соединительной ткани (крови), пищеварительной системе.
Цитология ферментов. Методика фракционирования ткани по субклеточным структурам. Изучение субклеточной локализации ферментов. Определение ферментов-маркеров лизосом, митохондрий, пероксисом, ядра, микросомальной фракции.
4. Методы выделения ферментов
Классические методы. Экстрагирование ферментов из биологического материала. Кислотная обработка, термическая обработка, фракционирование солями, органическими растворителями, ионообменная хроматография, гельфильтрация, электрофорез. Аффинная хроматография, носители и лиганды. Комбинирование различных методов для очистки ферментов. Критерии чистоты ферментных препаратов.
Иммобилизованные ферменты. Методы получения. Изучение свойств иммобилизованных ферментов.
5. Кинетические параметры и физико-химические свойства очищенных форм ферментов
